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浅述人白介素1elisa试剂盒的详细操作规程

发布时间: 2021-07-20  点击次数: 69次
  在试验室的常规ELISA测定中,将板从室温(通常在25℃摆布)置于37℃温箱,板也升温时,在外周孔与基地孔之间也许存在一热力学梯度。因而运用水浴或在将反响溶液参加至板孔中时,将板和溶液均加热至温育温度(如37℃),就可以很容易地扫除“边缘效应",而且可进步测定的重复性。
  今天要与大家分享的是人白介素1elisa试剂盒的详细操作规程:
  1、使用前请先将试剂盒在室温下平衡半小时。
  2、空白孔不加样,只加显色剂A,B和终止液用于调零。
  3、标准品孔:每孔加入稀释好的标准品50μl,零孔加入标准品/样品稀释液50μl,然后加入生物素抗原工作液50μl(零孔必须要做,并将其作为标曲的后一个点)。
  4、样品孔:加入样品50μl(推荐直接加样,浓度高可以用样品稀释液稀释2-5倍),然后加入生物素抗原工作液50μl。
  5、轻轻摇晃,盖上封板膜,37℃培养箱中孵育30min。
  6、将25倍浓缩洗涤液用蒸馏水25倍稀释后备用。
  7、次洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  8、加入50μl亲和素-HRP到标准品孔和样品孔中,轻轻摇晃,盖上封板膜,37℃培养箱中孵育30min。
  9、第二次洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  10、显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟。
  11、终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
  12、测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后10分钟以内进行。
  希望上述内容能够帮助大家更好的了解本产品。

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